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每幅图中均为两片相对的叶片原基

每幅图中均为两片相对的叶片原基

2019-07-12 19:45 作者:织梦园 围观:193

  原标题:焦雨铃团队回复eLife文章质疑,再次确认了拟南芥叶片原基中生长素的不对称空间分布模式。

  生长素探针DII(左)和非生长素响应对照探针mDII(右)在拟南芥第一对叶片原基中的表达。每幅图中L为两片相对的叶片原基,二者之间的箭头标示茎尖分生组织。mDII在叶片中均匀分布,而DII仅在叶片近轴面(靠近茎尖一侧)显著表达。图片来源:Vernoux et al. 2011, Molecular Systems Biology 7: 508, doi:10.1038/msb.2011.39。

  DII(domain II of Aux/IAA protein)做为标示生长素分布的探针,是研究生长素时空分布模式的重要工具。云顶国际网上娱乐mDII是对生长素不响应的DII突变探针,做为DII探针的负对照。DII和mDII探针均由组成型启动子35S驱动,雲顶国际娱乐注册广泛应用于生长素分布模式的分析。DII信号与生长素的分布呈负相关,而mDII对生长素不敏感。

  非生长素响应对照探针mDII(A-F)、生长素探针DII(G-L)和兼具二者的R2D2探针(M-W)在拟南芥第一对叶片原基中的表达。云顶国际网上娱乐每幅图中均为两片相对的叶片原基,从左到右依次为整体样品、光学纵切、光学横切。V和W为N和O的热图展示,以显示DII/mDII比值。图片来源:Guan et al. 2019, JIPB, doi:10.1002/jipb.12853。

  本研究利用不同方法对两种独立的生长素探针进行了检测,再次支持了生长素在叶片原基中的差异分布。通过对活体样品进行光学切片、对固定后的样品进行机械切片,再进行激光共聚焦显微成像,本研究对大量材料进行了观察。结果与之前的多篇报道一致:mDII对照探针在叶片原基中均匀分布,而DII探针信号在近轴面高于远轴面。

  本研究还提出Bhatia et al. 2019, eLife在实验和数据处理中均存在漏洞。雲顶国际娱乐通过比较不同方法,本研究发现活体成像由于样品遮挡,不同叶片区域的信号可存在显著的穿透性差异,且不同波长的荧光穿透能力会有所不同。本研究所用的机械切片可以解决该漏洞。Bhatia et al. 2019, eLife仅进行了活体成像,且样品中叶片疑似被人为拨开以暴露近轴面、遮挡远轴面。“摆拍”加剧了样品遮挡,造成35S启动子在近轴面活性高的假象。另一方面,Bhatia et al. 2019, eLife在数据统计时将DII信号极弱的叶片中间区人为划分成两部分,分别归入到近轴面和远轴面,提高了数据离散程度,造成叶片各区域DII/mDII比值(即生长素含量)差异不显著的假象。

  焦雨铃课题组的关春梅副研究员为论文的第一作者,焦雨铃研究员为通讯作者。该项目得到国家自然科学基金以及英国皇家学会牛顿高级学者项目的支持。返回搜狐,查看更多

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